Het afnemen van het sperma bij de reu geschiedt door een van de dierenartsen van de kliniek voor gezelschapsdieren eersel. Vervolgens kan men het gebruiken voor onderzoek, chilled of om in te vriezen. De afname kan het makkelijkst verricht worden met een loopse teef erbij in een rustige omgeving.  De reu is dan goed gestimuleerd en de kwaliteit van het sperma is dan in het algemeen het best. De reu ejaculeert in drie fracties waarvan alleen de tweede, de spermarijke fractie, gebruikt wordt voor verdere bewerking. De grootte hiervan is afhankelijk van het ras en grootte van de hond tussen de 0.1 cc en 3 cc. De derde fraktie, de prostaatfractie,  kan opgevangen worden voor verder onderzoek naar eventuele prostaataandoeningen. De eerste fractie is bedoeld om de urethra schoon te spoelen en wordt niet verder gebruikt. Zie ook de video.

Een mogelijkheid waar incidenteel gebruik van gemaakt wordt is het afnemen van zogenaamd epidydimaal sperma. Dit is sperma dat zich bevindt in de bijbal, het opslaggedeelte van de testikel. Na een castratie of zelfs na de dood van de reu kan men hieruit spermacellen extraheren die ingevroren kunnen worden voor later gebruik. Dit is een bij zeldzame rassen of exotische wilde dieren meer gebruikte methode om de genenpoel vast te leggen.